Background: Research on diagnostic methods have strongyloidiasis divergent validity and incomplete by not reporting data on safety, efficiency and performance diagnosis. Objective: To assess validity, performance, efficiency and safety of four diagnostic conventional parasitological methods for detection of Strongyloides stercoralis infection in the period 1980-2013. Methods: Systematic review with meta-analysis, exhaustive and reproducible literature search of six databases. Quality of the articles was assessed and meta-analysis was performed under the random effects model, calculating sensitivity, specificity, likelihood ratios, predictive values, proportion of false results, accuracy, odds ratio and Youden index J and ROC curve using Meta-DiSc(es) and Epidat 3.1. Results: 11 studies with 9,025 individuals were included. Sensitivity of the Baermann method was 72%, positive likelihood ratio (LR+) 228 and negative likelihood ratio (LR-) 0.32. The agar plate culture (APC) had a sensitivity of 89%, LR+ 341 and LR- 0.11. Stool sensitivity was 21%, LR+ 67 and LR- 0.67. Sensitivity of the formol-ether concentration was 48%, LR+ 110 and LR- 0.59. Areas under the ROC curve were 0.999 in Baermann and APC, 0.977 in the stool and 0.829 in formalin-ether concentration; specificity was 100% in all tests. Conclusion: The four conventional parasitological methods tested in this study to detect S. stercoralis can be helpful; however, agar plate culture and Baermann method are best suited.

Fundamentos: Las investigaciones sobre los métodos diagnósticos de estrongiloidiasis presentan divergencias en su validez y son incompletas al no reportar datos sobre seguridad, eficiencia y desempeño diagnóstico. El objetivo del trabajo fue evaluar la validez, desempeño, eficiencia y seguridad diagnósticas de cuatro métodos parasitológicos convencionales para la detección de la infección por Strongyloides stercoralis. Métodos: Revisión sistemática con metanálisis, búsqueda exhaustiva y reproducible de literatura en seis bases de datos para el período 1980-2013. Se evaluó la calidad de los artículos y se realizó metanálisis con el modelo de efectos aleatorios, calculando sensibilidad, especificidad, cocientes de probabilidad, valores predictivos, proporción de resultados falsos, exactitud, razón de odds, índice J de Youden y curva ROC, usando Meta-DiSc(es) y Epidat 3.1. Resultados: Se incluyeron 11 estudios con 9.025 individuos. La sensibilidad del método de Baermann fue del 72%, cociente de probabilidad positivo (CP+) 228 y cociente de probabilidad negativo (CP-) 0,32. El en placa de ágar (CPA) presentó una sensibilidad de 89%, CP+ 341 y CP- 0,11. En el examen directo en heces la sensibilidad fue del 21%; el CP+ 67 y el CP- 0,67. La sensibilidad de la concentración formol-éter fue del 48%, el CP+ 110 y el CP- 0,59. Áreas bajo la curva ROC de 0,999 en Baermann y CPA; 0,977 en el examen directo en heces y 0,829 en concentración formol-éter; la especificidad fue de 100% en todas las pruebas. Conclusiones: Los cuatro métodos parasitológicos convencionales evaluados en este estudio para la detección de S. stercoralis pueden ser útiles, sin embargo, resulta más idóneo implementar el en placa de ágar y el método de Baermann.

Background: Research on diagnostic methods have strongyloidiasis divergent validity and incomplete by not reporting data on safety, efficiency and performance diagnosis. Objective: To assess validity, performance, efficiency and safety of four diagnostic conventional parasitological methods for detection of Strongyloides stercoralis infection in the period 1980-2013. Methods: Systematic review with meta-analysis, exhaustive and reproducible literature search of six databases. Quality of the articles was assessed and meta-analysis was performed under the random effects model, calculating sensitivity, specificity, likelihood ratios, predictive values, proportion of false results, accuracy, odds ratio and Youden index J and ROC curve using Meta-DiSc(es) and Epidat 3.1. Results: 11 studies with 9,025 individuals were included. Sensitivity of the Baermann method was 72%, positive likelihood ratio (LR+) 228 and negative likelihood ratio (LR-) 0.32. The agar plate culture (APC) had a sensitivity of 89%, LR+ 341 and LR- 0.11. Stool sensitivity was 21%, LR+ 67 and LR- 0.67. Sensitivity of the formol-ether concentration was 48%, LR+ 110 and LR- 0.59. Areas under the ROC curve were 0.999 in Baermann and APC, 0.977 in the stool and 0.829 in formalin-ether concentration; specificity was 100% in all tests. Conclusion: The four conventional parasitological methods tested in this study to detect S. stercoralis can be helpful; however, agar plate culture and Baermann method are best suited.

Fundamentos: Las investigaciones sobre los métodos diagnósticos de estrongiloidiasis presentan divergencias en su validez y son incompletas al no reportar datos sobre seguridad, eficiencia y desempeño diagnóstico. El objetivo del trabajo fue evaluar la validez, desempeño, eficiencia y seguridad diagnósticas de cuatro métodos parasitológicos convencionales para la detección de la infección por Strongyloides stercoralis. Métodos: Revisión sistemática con metanálisis, búsqueda exhaustiva y reproducible de literatura en seis bases de datos para el período 1980-2013. Se evaluó la calidad de los artículos y se realizó metanálisis con el modelo de efectos aleatorios, calculando sensibilidad, especificidad, cocientes de probabilidad, valores predictivos, proporción de resultados falsos, exactitud, razón de odds, índice J de Youden y curva ROC, usando Meta-DiSc(es) y Epidat 3.1. Resultados: Se incluyeron 11 estudios con 9.025 individuos. La sensibilidad del método de Baermann fue del 72%, cociente de probabilidad positivo (CP+) 228 y cociente de probabilidad negativo (CP-) 0,32. El en placa de ágar (CPA) presentó una sensibilidad de 89%, CP+ 341 y CP- 0,11. En el examen directo en heces la sensibilidad fue del 21%; el CP+ 67 y el CP- 0,67. La sensibilidad de la concentración formol-éter fue del 48%, el CP+ 110 y el CP- 0,59. Áreas bajo la curva ROC de 0,999 en Baermann y CPA; 0,977 en el examen directo en heces y 0,829 en concentración formol-éter; la especificidad fue de 100% en todas las pruebas. Conclusiones: Los cuatro métodos parasitológicos convencionales evaluados en este estudio para la detección de S. stercoralis pueden ser útiles, sin embargo, resulta más idóneo implementar el en placa de ágar y el método de Baermann.

Resumen Introducción. Algunas especies de protozoos y helmintos parasitan el sistema digestivo de diferentes hospedadores vertebrados, poniendo en riesgo la conservación de animales silvestres que se encuentran en cautiverio para su rehabilitación y posterior reintroducción al hábitat. Objetivo. Evaluar el parasitismo intestinal en monos aulladores rojos (Aloutta seniculus) mantenidos en cautiverio para su rehabilitación en el Centro de Atención, Valoración y Rehabilitación de Fauna Silvestre -CAVR- Ecosantafé, Jericó, Colombia. Materiales y métodos. Se realizó un estudio descriptivo en el que se recolectaron 21 muestras de materia fecal mediante un muestreo por conveniencia durante junio, septiembre y diciembre de 2011. Se analizó cada muestra mediante microscopía directa (examen en fresco y coloraciones: Ziehl Neelsen modificada y Gram cromotropo), técnica de concentración Mini Parasep®, y cultivos de materia fecal en agar y Harada Mori. Resultados. Se observó un porcentaje de parasitación (al menos un parásito) de 95,2 % y de multiparasitismo de 71,4 %, sin diferencias estadísticamente significativas entre individuos de ambos sexos, ni entre individuos adultos y juveniles. Los parásitos detectados corresponden a la familia Trichomonadidae (95,2 %) y a los géneros Giardia (52,4 %), Blastocystis (42,9 %), Strongyloides (21,1 %), Cryptosporidium (14,3 %) y a la especie Entamoeba coli (9,5 %). Conclusión. Los hallazgos de este estudio tienen importancia por la repercusión negativa que pueden tener los parásitos intestinales en la salud, rehabilitación y conservación de Alouatta seniculus y de otras especies silvestres; además, las parasitosis detectadas se consideran anfixenosis, lo que sugiere también la importancia de estos hallazgos en la salud pública.

Abstract Introduction. Some species of protozoa and helminthes parasitize the digestion system of some vertebrate hosts, jeopardizing the conservation of wild animals that are in captivity for their rehabilitation and subsequent reintroduction into their habitats. Objective. To evaluate intestinal parasitism in red howler monkeys (Aloutta seniculus) kept in captivity for their rehabilitation in the center for attention, assessment and rehabilitation of wild animals (CAVR for its acronym in Spanish) Ecosantafé, in Jericó, Antioquia. Materials and methods. A descriptive study was performed, collecting 21 samples of stool by the use of a convenience sampling during June, September and December, 2011. Each sample was analyzed with direct microscopy (direct smear and colors: modified Ziehl Neelsen and Gram chromotrope), Mini Parasep® concentration technique and stool cultures in agar and Harada Mori. Results. A parasitism (at least one parasite) of 95,2%, and a 71,4% of multiparasitism percentages were observed, with no statistically significant differences between individuals of both sexes or between young and adult individuals. The parasites detected belong to the Trichomonadidae family (95,2 %) the genera Giardia (52,4 %), Blastocystis (42,9 %), Strongyloides (21,1 %), Cryptosporidium (14,3 %) and the Entamoeba coli species (9,5 %). Conclusion. The findings of this study are important, given the negative consequences intestinal parasites can have for the health, the rehabilitation and the conservation of the Alouatta seniculus and other wild species. Besides, the parasites detected are considered as amphixenosis, which means that these findings are also important for public health.

Resumo Introdução. Algumas espécies de protozoários e helmintos parasitas o sistema digestivo de diferentes hospedadores vertebrados, pondo em risco a conservação de animais silvestres que se encontram em cativeiro para sua reabilitação e posterior reintrodução ao habitat. Objetivo. Avaliar o parasitismo intestinal em Bugio-vermelhos (Aloutta seniculus) mantidos em cativeiro para sua reabilitação no Centro de Atendimento, Valoração e Reabilitação de Fauna Silvestre -CAVR- Ecosantafé, Jericó, Colômbia. Materiais e métodos. Realizou-se um estudo descritivo no que se coletaram 21 mostras de matéria fecal mediante um mostro por conveniência durante junho, setembro e dezembro de 2011. Analisou-se cada mostra mediante microscopia di-reta (exame em fresco e colorações: Ziehl Neelsen modificada e Gram cromotrope), técnica de concentração Mini Parasep®, e cultivos de matéria fecal em ágar e Harada-Mori. Resultados. Observou-se uma porcentagem de parasitas (ao menos um parasita) de 95,2 % e de multiparasitismo de 71,4 %, sem diferenças estatisticamente significativas entre indivíduos de ambos sexos, nem entre indivíduos adultos e juvenis. Os parasitas detectados correspondem à família Trichomonadidae (95,2 %) e aos gêneros Giardia (52,4 %), Blastocystis (42,9 %), Strongyloides (21,1 %), Cryptosporidium (14,3 %) e à espécie Entamoeba coli (9,5 %). Conclusão. Os achados deste estudo têm importância pela repercussão negativa que podem ter os parasitas intestinais na saúde, reabilitação e conservação de Alouatta seniculus e de outras espécies silvestres; ademais, as parasitoses detectadas se consideram anfixenose, o que sugere também a importância destes achados na saúde pública.

To elucidate the Anopheles nuneztovari s.l. taxonomic status at a microgeographic level in four malaria endemic localities from Antioquia and Córdoba, Colombia, fragments of the cytochrome oxidase subunit I (COI) and the white gene were used. The COI analysis showed low genetic differentiation with fixation index (F ST) levels between -0.02-0.137 and Nm values between 3-∞, indicating the presence of high gene flow among An. nuneztovari s.l. populations from the four localities. The COI network showed a single most common haplotype, type 1 (n = 55), present in all localities, as the likely ancestral haplotype. Analysis of the white gene showed that An. nuneztovari s.l. populations from both departments grouped with haplotypes 19 and 20, which are part of lineage 3 reported previously. The results of the present study suggest that An. nuneztovari s.l. is a single taxon in the area of the present study.

Se optimizó un protocolo para la extracción de ADN a partir de mosquitos anofelinos, evaluando varios tiempos de incubación de la muestra con el acetato de potasio (AcK). Los resultados evidenciaron que la mayor concentración de ADN y frecuencia de amplificación se obtuvieron al utilizar el tratamiento de 1 h, lo que sugiere que es posible reducir el tiempo de incubación con AcK sin afectar la cantidad y calidad del ADN extraído.

A DNA extraction protocol for anopheline mosquitoes was optimized by the evaluation of various incubation times of the sample with Potassium acetate (KAc). The results showed that the highest DNA concentration and amplification frequency were obtained with the 1 h treatment, which suggests that is possible to reduce the incubation time with KAc without affecting the amount and quality of the DNA extracted.

An understanding of the taxonomic status and vector distribution of anophelines is crucial in controlling malaria. Previous phylogenetic analyses have supported the description of six species of the Neotropical malaria vector Anopheles (Nyssorhynchus) albitarsis s.l. (Diptera: Culicidae): An. albitarsis, Anopheles deaneorum, Anopheles marajoara, Anopheles oryzalimnetes, Anopheles janconnae and An. albitarsis F. To evaluate the taxonomic status of An. albitarsis s.l. mosquitoes collected in various localities in the Colombian Caribbean region, specimens were analyzed using the complete mitochondrial DNA cytochrome oxidase I (COI) gene, the ribosomal DNA (rDNA) internal transcribed spacer 2 (ITS2) region and partial nuclear DNA white gene sequences. Phylogenetic analyses of the COI gene sequences detected a new lineage closely related to An. janconnae in the Caribbean region of Colombia and determined its position relative to the other members of the complex. However, the ITS2 and white gene sequences lacked sufficient resolution to support a new lineage closely related to An. janconnae or the An. janconnae clade. The possible involvement of this new lineage in malaria transmission in Colombia remains unknown, but its phylogenetic closeness to An. janconnae, which has been implicated in local malaria transmission in Brazil, is intriguing.

El Grupo Oswaldoi, subgénero Nyssorhynchus (Diptera: Culicidae), incluye 16 especies. Algunas de estas especies presentan una alta variabilidad morfológica intraespecífica y similitud interespecie; lo anterior puede ocasionar dificultad en la identificación de la hembra al usar las claves morfológicas, como ocurre con Anopheles nuneztovari, considerado vector primario de malaria en Colombia. En este trabajo se comparó la utilidad de cinco claves morfológicas para la identificación de especímenes A. nuneztovari recolectados en la localidad de Puerto Anchica, Montelibano, Córdoba, Colombia. Se analizaron tres relaciones morfométricas y se confirmó la identificación morfológica utilizando la técnica PCR-RFLP basada en secuencias ITS2. El análisis de 41 hembras usando las claves, mostró que los especímenes A. nuneztovari presentaron sobrelapamiento morfológico con otras especies del Grupo Oswaldoi, como: A. rangeli, A. oswaldoi, A. evansae y A. benarrochi. El análisis molecular confirmó que todos los especímenes corresponden a A. nuneztovari. Dado que el uso de claves morfológicas continúa siendo la estrategia de elección para la identificación de anofelinos, los resultados sugieren que en caso de especies problemáticas, es conveniente confirmar la identificación mediante herramientas moleculares desarrolladas con el respaldo de la identificación de estadios inmaduros.

The Oswaldoi Group, subgenus Nyssorhynchus (Diptera: Culicidae), includes 16 species. Some of these species exhibit high intraspecific morphological variability and interspecific similarity; this can lead to difficulty in the identification of females by using morphological keys, as is the case with Anopheles nuneztovari, considered a primary malaria vector in Colombia. In this study we compared the usefulness of five morphological keys for the identification of A. nuneztovari specimens collected in the locality of Puerto Anchica, Montelibano, Córdoba, Colombia. Three morphometric ratios were analyzed and morphological identification results were confirmed using the PCR-RFLP technique based on ITS2 sequences. The analysis of 41 females using the keys showed that A. nuneztovari specimens presented overlap with other species of the Oswaldoi Group, such as A. rangeli, A. oswaldoi, A. evansae and A. benarrochi. Molecular analysis confirmed that all of the specimens corresponded to A. nuneztovari. Because the use of morphological keys continue to be a strategy of choice for the identification of anophelines, the results suggest that in the case of problematic species, it is convenient to confirm identification using molecular methods developed with the support of the identification of immature stages.

Malaria is a serious health problem in the states of Córdoba and Antioquia, Northwestern Colombia, where 64.4% of total Colombian cases were reported in 2007. Because little entomological information is available in this region, the aim of this work was to identify the Anopheles species composition and natural infectivity of mosquitoes distributed in seven localities with highest malaria transmission. A total of 1,768 Anopheles mosquitoes were collected using human landing catches from March 2007-July 2008. Ten species were identified; overall, Anopheles nuneztovari s.l. was the most widespread (62%) and showed the highest average human biting rates. There were six other species of the Nyssorhynchus subgenus: Anopheles albimanus (11.6%), Anopheles darlingi (9.8%), Anopheles braziliensis (6.6%), Anopheles triannulatus s.l. (3.5%), Anopheles albitarsis s.l. and Anopheles oswaldoi s.l. at < 1%; and three of the Anopheles subgenus: Anopheles punctimacula, Anopheles pseudopunctipennis s.l. and Anopheles neomaculipalpusat < 1% each. Two species from Córdoba, An. nuneztovari and An. darlingi, were found to be naturally infected by Plasmodium vivax VK247, as determined by ELISA and confirmed by nested PCR. All species were active indoors and outdoors. These results provide basic information for targeted vector control strategies in these localities.